羅氏蛋白酶磷酸酶抑制劑解決了對磷酸化狀態的有效保護 羅氏蛋白酶磷酸酶抑制劑許多生物學過程和通路的調節都伴隨著磷酸酯的形成和去除;而蛋白的磷酸化狀態的平衡是由蛋白激酶和磷酸酶相互影響達到的。為了了解這些通道,大量的研究工作正在制藥公司和研究院所開展。其中一個重要的步驟就是準確的觀察一般和特異的磷酸化狀態,而這就需要對磷酸化狀態的有效保護。
磷酸化的蛋白可以被非特異性的磷酸酶(例如:堿性磷酸酶),特異性的絲氨酸/蘇氨酸磷酸酶、酪氨酸蛋白磷酸酶或雙重特異性磷酸酶去磷酸化。這里,我們就一種新的磷酸酶抑制劑混合片的性能做一介紹,稱之為PhosSTOP。PhosSTOP是一種即用型的片劑,其中的一些磷酸酶抑制劑只需要納摩爾級的量。羅氏蛋白酶磷酸酶抑制劑無需花費漫長的時間尋找合適的磷酸酶,也不必繁瑣的稱量和混合。PhosSTOP可同時持續抑制包括酸性和堿性磷酸酶,及絲氨酸/蘇氨酸蛋白磷酸酶(PP1, PP2A, PP2B)和酪氨酸蛋白磷酸酶在內的多種磷酸酶。
一片PhosSTOP可以溶解在10ml的緩沖液中。PhosSTOP具有*的溶解性,如果需要,可以將2-3片PhosSTOP也可溶解在同樣體積的緩沖液中;相反,也同樣也可以選用小體積的緩沖液。溶解后的儲存液體4℃可以穩定保存一個月以上,-20℃下可以保存6個月。
羅氏蛋白酶磷酸酶抑制劑磷酸酶無處不在;依賴于不同的物種、細胞或組織類型、實驗中使用的特異的細胞狀態,磷酸酶的種類和數量都會有差異。雖然每種磷酸酶都表現出不同的底物特異性,依賴不同的物種,幾種分離磷酸酶用以測試抑制效果的范圍。