線粒體膜電位熒光探針是我們的膜標記1-43的縮寫,化學上稱為N-(3-三乙基氨基丙基)-4-(4-(二丁基氨基)苯乙烯基)吡啶鎓二溴化物。它是一種水溶性膜探針,屬于苯乙烯基染料家族。它廣泛用于細胞生物學和神經生物學,因為它對細胞的毒性極小。線粒體膜電位熒光探針在水性介質中幾乎不發熒光,并且在與膜結合后強烈發熒光。它用標準熒光素光學濾光片有效激發,并且當與質膜結合時表現出強烈的熒光信號。線粒體膜電位熒光探針經常被用于量化神經元中的胞吐作用。
線粒體膜電位熒光探針是一種新型的用來監測線粒體膜電位變化的熒光探針,是JC-1的*替代物。與JC-1相比,具有以下幾個重要優勢:
1、溶解性得以改良,在水溶液中形成沉淀可能性明顯降低;
2、使用更方便,簡化步驟將手動操作時間最小化;
3、熒光信號更高,改良的信號與背景熒光的信噪比;
4、結果更穩定,優化探針以保證更連續性和穩定性結果。
使用方法:
1、染色液制備:
?、賰Υ嬉褐苽洌河肈MSO或無水乙醇配置濃度1~5 mM的儲存液。例如,取10mg 熒光探針(Mw:460.31 g/mol)溶于4.35ml 無水DMSO中,充分溶解,即得到5mM的儲存液。
?、诠ぷ饕褐苽洌河煤线m的緩沖液稀釋儲存液,調整到合適的工作濃度。
2、染色方法:
對于細菌染色,最好取對數生長期的健康細菌,用無菌PBS或其他適當平衡鹽緩沖液稀釋到~1 x 106cells/ml。也可直接從細菌培養液中取適量的細菌不經清洗進行稀釋。細菌染色用熒光探針的工作濃度可為30μM,室溫染色15~30min。