產品信息
產品貨號 | 產品名稱 | 規格 | 價格(元) |
FS0354-1ML | RNase A (10 mg/ml) 核糖核酸酶A(10 mg/ml) | 1ml | 90.00 |
FS0355-1ML | RNase A (100 mg/ml) 核糖核酸酶A(100 mg/ml) | 1ml | 700.00 |
核糖核酸酶A(核酸純化與電泳) 核糖核酸酶A(核酸純化與電泳)
產品描述
核糖核酸酶A(Ribonuclease A,常用縮寫RNase A),一種含4個二硫鍵的單鏈多肽,分子量約為13.7kDa(氨基酸序列)。作為一種核糖核酸內切酶(endoribonuclease),特異性降解單鏈RNA上的胞嘧啶(C)或尿嘧啶(U)殘基。具體來說,切割識別的是由某核苷酸上的5’-核糖和相鄰的嘧啶類核苷酸3’-核糖上磷酸基團形成的磷酸二酯鍵,從而使得2’, 3’-環磷酸水解為對應的3’-核苷磷酸(比如,pG-pG-pC-pA-pG經RNase A切割產生pG-pG-pCp 和A-PG)。RNase A切割單鏈RNA活性GAO,推薦工作濃度為1-100μg/ml,兼容于各種反應體系。低鹽濃度(0-100mM NaCl),可用來切割單鏈RNA,雙鏈RNA,以及RNA-DNA雜交形成的RNA鏈。然而,高鹽濃度(≥0.3M),RNase A僅特異性切割單鏈RNA。
核糖核酸酶A(RNase A)常見的應用在于質粒DNA或基因組DNA制備過程中去除RNA,此制備過程中DNase酶活性的存在與否是需要重視的污染之一,可采用水浴煮沸這種傳統方法來滅活DNase活性。另外,本品還可用于RNA酶保護分析、RNA序列分析等分子生物學實驗。
本產品為:RNase A (100 mg/ml) 核糖核酸酶A(100 mg/ml)溶液
產品屬性
外觀:RNase A (100 mg/ml) 核糖核酸酶A(100 mg/ml)溶液
激活劑:鈉鹽、鉀鹽等
抑制劑:核酸酶抑制劑
失活方法:加熱不會失活,建議用離心柱或者酚氯FANG抽提來充分去除
來源:牛胰腺
溶解性:溶于水(10mg/ml)
干燥失重:≤5.0%
酶活力:≥50 Kunitz units/mg 活性同sigma R4875
運輸和保存方法
冰袋運輸。-20℃干燥保存,3年有效。
注意事項
1) 本品在生產過程中已經過相應方法去除DNase污染,對于常規質粒DNA或者基因組DNA抽提(不需要嚴格定量DNA水平)的應用,可不需要高溫煮沸,直接配制母液即可。對于需要嚴格控制DNase酶殘留的實驗,建議高溫煮沸或者購買DNase-free, protease-free的RNase A溶液(10mg/ml)
2) RNase A會強吸附在玻璃器皿上,建議溶液裝到塑料離心管內。
3) 對于同時操作完整RNA實驗的研究人員,一定要謹防RNase A引入干擾試驗結果的準確性。
4) 為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
儲存液制備
注意:此為RNase A儲存液配制的常用方法之一,也可以根據實驗室傳統的方法,或者參考文獻資料使用其他方法制備儲存液(如直接溶于10mM Tris-Cl, pH7.5;或者Tris-NaCl溶液)。
1) 利用10mM的醋酸鈉(pH5.2)制備10mg/ml 的RNase A 儲存液;
2) 00℃加熱15min;
3) 冷卻到室溫,加入1/10體積的1M Tris-HCl(pH7.4),調其pH至7.4(例如,5ml 10mg/ml的RNase 儲存液加入500μl 1M Tris-HCl, pH7.4);
4) 分裝于-20℃凍存,可穩定保存長達2年。
注意:在中性條件下煮沸RNase A溶液,會有RNase沉淀形成;在更低的pH下將其煮沸,如有沉淀可以觀察到,可能由于蛋白雜質存在造成。煮沸之后若發現沉淀,可通過高速離心(13,000 rpm)去除雜質,然后分裝凍存
注意事項
為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
用途:本品僅供科研,不得用于其它用途。
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